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SARS-CoV-2 (+)ssRNA Detektion via CRISPR-Cas |
Analog zum WHO empfohlenen PCR Verfahren werden wir die RNA Sequenz des Envelope E-Proteins von SARS-CoV-2 detektieren. In den letzten 7 Jahren hat das CRISPR-Cas System in der Life Science Community laufend an Bedeutung gewonnen. Ursprünglich wurde dieses in der Biotechnologie zum gezielten Editieren von doppelsträngiger DNA angewendet. Inzwischen ist die CRISPR-Cas Toolbox ständig mit neuen Entwicklungen erweitert worden. Seit einigen Jahren sind ebenfalls RNA bindende CRISPR-Cas Systeme (RNdCas) bekannt, mit und ohne katalytischer Funktion. In unserem Nachweisverfahren sind wir an der spezifischen RNA Bindung von zwei inaktiven dCas13 Komplexen interessiert. Letztes Jahr wurde ein ähnliches Prinzip mit zwei inaktiven dCas9 Komplexen zur Detektion doppelsträngiger DNA angewendet. Diesen Frühling wurde via CRISPR-Cas eine hervorragende Nachweisgrenze zur SARS-CoV-2 Detektion experimentell bestätigt (Broughton et al. 2020). |
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